做冰冻切片是不是总遇到 组织碎成渣、切片卷边、染色脱片? 别怕!手把手教你 从取材到染色 的完整流程,轻松get完美切片!
1️⃣ 包埋选择:蔗糖VS直接
蔗糖预处理:
✅ 减少冰晶、保护抗原(适合长期保存)
耗时12-48h,组织会轻微收缩
直接包埋:
快速(适合急诊标本)
冰晶风险高(需严格控温!)
2️⃣ 速冻核心技巧
关键:5-10秒液氮速冻!
⚠️ 注意:
组织厚度≤3mm(过厚易冰晶!)
异戊烷-70℃速冻更温和(脂肪组织首选!)
3️⃣ 切片防翻车指南
修片:10-20μm粗切暴露组织面
正式切:4-8μm匀速切片(手要稳!)
防卷边:毛笔轻托+防卷板调节
贴片:用预冷载玻片!(室温玻片=融化!)
4️⃣ 固定染色避坑
固定:4%多聚甲醛15min(通风橱!)
漂洗:PBS洗3次×5min(防脱片!)
染色:
脂肪组织?冷丙酮预固定!
易脱片?用防脱玻片!
5️⃣ 常见问题急救包
🚑 组织碎:升温至-16℃+减少暴露
🚑 切片皱:调节防卷板间隙!
🚑 冰晶多:改用异戊烷速冻+切薄