做冰冻切片是不是总遇到 组织碎成渣、切片卷边、染色脱片? 别怕!手把手教你 从取材到染色 的完整流程,轻松get完美切片!

1️⃣ 包埋选择:蔗糖VS直接

蔗糖预处理:

✅ 减少冰晶、保护抗原(适合长期保存)

耗时12-48h,组织会轻微收缩

直接包埋:

快速(适合急诊标本)

冰晶风险高(需严格控温!)

2️⃣ 速冻核心技巧

关键:5-10秒液氮速冻!

⚠️ 注意:

组织厚度≤3mm(过厚易冰晶!)

异戊烷-70℃速冻更温和(脂肪组织首选!)

3️⃣ 切片防翻车指南

修片:10-20μm粗切暴露组织面

正式切:4-8μm匀速切片(手要稳!)

防卷边:毛笔轻托+防卷板调节

贴片:用预冷载玻片!(室温玻片=融化!)

4️⃣ 固定染色避坑

固定:4%多聚甲醛15min(通风橱!)

漂洗:PBS洗3次×5min(防脱片!)

染色:

脂肪组织?冷丙酮预固定!

易脱片?用防脱玻片!

5️⃣ 常见问题急救包

🚑 组织碎:升温至-16℃+减少暴露

🚑 切片皱:调节防卷板间隙!

🚑 冰晶多:改用异戊烷速冻+切薄